NESMAGET^®（Nissin's Evaluation Systems for MAmmalian GEnoToxicity）
NESMAGET^®は、ＤＮＡが損傷された時にp53の結合により発現調節されるＤＮＡ修復遺伝子p53R2の発現に基づくヒト細胞を用いた遺伝毒性試験法です。
あらゆる化学物質の変異原性に関するファーストスクリーニングに適用可能です。

NESMAGET^®の原理

　本試験は、ＤＮＡ損傷時、p53によって誘導される ＤＮＡ修復遺伝子 p53R2 が発現することを利用します。p53R2 遺伝子のイントロン1に含まれる p53結合配列の3回繰り返し配列を組み込んで構築した p53BS-Lucレポータープラスミドをヒト由来細胞に一過性発現し使用しています。被検物質添加24時間後の p53R2依存的ルシフェラーゼ活性を測定することで遺伝毒性を評価します。

NESMAGETの特長

• 　(1)ヒト培養細胞を使用し、微生物で検出できなかった遺伝毒性物質が検出可能
• 　(2)トポⅡ阻害剤、トポⅠ阻害剤、アルキル化剤、ＤＮＡ架橋剤、微小管阻害剤など、様々なＤＮＡ損傷様式を有する遺伝毒性物質に対して反応性を示す
• 　(3)試験期間が 24時間と短く、一度に多数の試験が可能
• 　(4)Ａｍｅｓ 試験の 1/100 量（数ｍｇ）という少量の被検物質で試験可能
• 　(5)被検物質への Ｓ9ミックス 添加による代謝活性法にも対応可能
• 　(6)発光による検出のため、蛍光物質、色素等も試験可能

既存試験法との高い一致率

NESMAGET^®法: 濃度依存性を示し、有意なルシフェラーゼ活性の上昇が認められた時、陽性(+)と判断した。細胞は、ヒト乳癌細胞株MCF-7を使用。
Ames, in vitro mammalian cells: (マウスリンフォーマTK試験、または染色体異常試験)、げっ歯類発癌性については、NTP, TOXNETのデータ参照。
IARC (International Agency for Research on Cancer ) でのハザード評価。

※Ames試験との一致率

• 　一致率：（ＮＥＳＭＡＧＥＴ^® ｖｓ Ａｍｅｓ試験結果一致率） 　 　 81.5％
• 　Ａｍｅｓ陽性予測率：（ＮＥＳＭＡＧＥＴ^®陽性 ｖｓ Ａｍｅｓ陽性） 94.3％
• 　Ａｍｅｓ陰性予測率：（ＮＥＳＭＡＧＥＴ^®陰性 ｖｓ Ａｍｅｓ陰性） 67.2％
• 　ＮＥＳＭＡＧＥＴ^®陰性、かつ、Ａｍｅｓ陽性の物質　4物質：　これらは発がん性を持たない。
• 　ＮＥＳＭＡＧＥＴ^®陽性、かつ、Ａｍｅｓ陰性の物質21物質：　これらの多くは発がん性を有する。

※げっ歯類発がん性試験との比較*

• 　ＮＥＳＭＡＧＥＴ^®の発がん性試験との一致率： 86.6％
• 　Ａｍｅｓ試験の発がん性試験との一致率： 71.1％
• 　他の変異原性試験と発がん性試験の一致率： 74.0％
• 　*日清食品ホールディングス株式会社 食品安全研究所で実施した遺伝毒性物質、被遺伝毒性物質の計135物質についての比較結果